当时方位:主页食物资讯食物科技加工工艺 酶解法 & 发酵法制备罗非鱼皮胶原蛋白粗肽

  中心提示：罗非鱼是我国重要的饲养鱼类，其鱼皮中氨基酸组成合理且胶原蛋白含量较高，使罗非鱼皮成为胶原蛋白肽的优质来历。现在，制备胶原蛋白肽最常用的是酶解法和微生物发酵法，本文总结了这两种胶原蛋白肽的制备办法。

  胶原蛋白是动物体内重要的蛋白质，约占总蛋白含量的25%。胶原蛋白肽，是胶原蛋白适度降解后构成的一种多肽，具有抗氧化、抗衰老、降血压、促进皮肤胶原代谢、免疫调理等多种生理功能。

  罗非鱼是我国重要的，其鱼皮中氨基酸组成合理且胶原蛋白含量较高，使罗非鱼皮成为胶原蛋白肽的优质来历。

  现在，制备胶原蛋白肽最常用的是酶解法和微生物发酵法，本文总结了这两种胶原蛋白肽的制备办法。

  ①罗非鱼皮的破坏 ②碱溶酸沉提蛋白 ③胶原蛋白粗提物的精制 ④

  ①罗非鱼皮的破坏：将鱼皮去鳞除杂，洗净后充沛沥干，切分成约1 cm×1 cm×1cm的碎块并经打粉机破坏。

  ②碱溶：在罗非鱼皮中参加0.5%的氢氧化钠溶液浸泡2h，清洗2次，再参加蒸馏水，在研磨机中匀浆至糊状，制得总蛋白粗提物。

  ③酸沉：将总蛋白粗提物调整pH值为2，加热至75℃，保温提胶3h，制得胶原蛋白粗提物。

  ④胶原蛋白粗提物的精制：将弄清剂参加胶原蛋白粗提物中，调整pH值为2，均匀拌和后静置2h，制得胶原蛋白精制物。

  其间，弄清剂为秋葵胶，仙草胶，瓜尔豆胶以质量比1:2:4混兼并静置4-6h，弄清剂的参加量为胶原蛋白粗提物质量的0.1-2%，弄清剂的pH值为2-4。

  ⑤胶原蛋白肽的制备：将胶原蛋白精制物调理pH值为7，参加复合蛋白酶酶解，在温度为45℃的条件下，酶解2h，得到酶解液。

  其间，复合蛋白酶为碱性蛋白酶和风味酶，质量比为5:2,组合酶的参加量为胶原蛋白精制物质量的0.4%-1%，酶解pH值为7.5-8.0。

  ①罗非鱼皮粉 ②固态发酵培育基的制备 ③种子液的制备 ④接种、发酵 ⑤加水过滤（纱布） ⑥粗酶液的制备 ⑦过滤、冻干 ⑧胶原蛋白粗肽

  ①鱼皮的预处理：将鱼皮去鳞除杂，洗净后充沛沥干，切分成约1 cm×1 cm×1cm的碎块并经打粉机破坏，冷冻至-20℃，密封备用。

  ②固态发酵培育基的制备：将处理好的鱼皮进行灭菌（121℃高温灭菌20 min），再在无菌条件下参加一定量的灭菌蒸馏水，调理培育基初始pH，作为固态发酵培育基。

  ③种子液的制备：将B.subtilis CCTCC AB 90008从甘油保藏管接种至养分琼脂培育基中，37 ℃恒温培育24 h，将活化好的菌种接至种子培育基（牛肉膏3 g/L，蛋白陈10 g/L，NaCl5 g/L，pH 7.2～7.4）中，于37 ℃、120r/min摇床培育一段时刻，制得种子液。

  ④接种、发酵：按菌种接种量50 g/L接入培育好的发酵种子液，恒温静置培育，并每隔5h拌和1次。发酵条件为：培育基初始pH值为7，种子液菌龄为14 h，发酵温度为35 ℃，发酵时刻为24 h。

  ⑤粗酶液的制备：发酵完毕后，向鱼皮培育基中参加0.1mol/L柠檬酸钠缓冲液（pH 6.2），于5 000 r/min离心15 min，取上清液作为胶原酶粗酶液。

  ⑥过滤、冻干：用0.45 m的滤膜过滤发酵液，开始去除发酵液中的杂质，搜集滤液进行冻干，得固态发酵罗非鱼皮胶原蛋白粗肽。

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